适用细胞系
杂交瘤无血清培养基是普诺赛研发团队开发的无血清产品,适用于杂交瘤、骨髓瘤细胞的高密度生长和蛋白的稳定表达。
培养基特性
1. 本品不含血清,含有少量水解物、蛋白、生长因子组分。
2. 培养基含有L-谷氨酰胺和HT。
培养条件
1. 培养温度37℃±0.5℃,摇床转速100-120rpm(振幅50 mm)。
2. 在非自动控制pH值条件下,建议CO2浓度控制在5%。
3. pH、DO及温度等工艺条件可根据工艺开发结果或平台工艺参数设定。
培养基适应(推荐)
1. 直接适应:最初培养阶段,细胞按初始密度 0.75×106cells/mL 接种,直接将培养基更换为杂交瘤无血清培养基,进行细胞培养。待细胞培养2-3代,且细胞生长稳定后进行后续实验。杂交瘤细胞稳定生长时按照0.75×106cells/mL密度接种,培养48h后细胞密度可达3-5×106 cells/mL。
2. 间接适应:杂交瘤无血清培养基与细胞原培养基1:1比例混合,培养细胞,连续传代2-3代,细胞稳定生长后可将培养基更换为杂交瘤无血清培养基,连续传代2-3代,细胞生长稳定后进行后续实验。杂交瘤细胞稳定生长时按照0.75×106cells/mL密度接种,培养48h后细胞密度可达3-5×106cells/mL。
(注:具体培养工艺可根据实际项目需求自行调整)
数据支撑
细胞冻存
1. 使用本品制成的冻存培养基进行细胞冻存,配制细胞冻存液:冻存液=70%培养基+20%FBS(建议使用进口胎牛血清)+10%DMSO,冻存液配好后置于4℃冰箱预冷(冻存液配制时,先加培养基再加血清或DMSO,防止DMSO浓度过高导致血清有效成分变性)。
2. 细胞冻存密度1.5-2.0×107cells/mL,推荐2.0×107cells/mL。
保存条件
2-8℃,避光保存,有效期12个月。
FAQs
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