本司产品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗

离心柱式外泌体分离试剂盒

货号:P-CA-504

价格:¥36805680

规格:
20 Tests
  • 20 Tests
  • 50 Tests
数量: - +
产品概述
产品描述 本试剂盒是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。本产品不仅能实现超快速外泌体分离,还可快速去除游离的外泌体标记染料。
分离方法 尺寸排阻离心柱法
运输条件 冰袋运输
保存条件 2-30℃或2-8℃
保质期 18个月
产品组分
规格 组分名称 含量 保藏温度
20 Tests/50 Tests Spin Column 01 20 EA/50 EA 2-8℃ 避光保存
20 Tests/50 Tests Collection Tubes (2 mL) 20 EA/50 EA 2-30℃ 避光保存
20 Tests/50 Tests Solution A 25 mL/100 mL 2-8℃ 避光保存
自备仪器耗材
高速冷冻离心机、侧摆摇床、2mL离心管/1.5 mL离心管、磁力架、超滤管(MWCO:50 kDa)、超滤管(MWCO:10 kDa)
使用方法

(一)使用方法(外泌体分离使用方法)

1. 样品预处理

1) 去除细胞。4℃,300 g,离心5 min,转移上清到新的离心管;

注意:对无细胞的样品,可以跳过此步骤。

2) 去除细胞及细胞碎片。4℃2000 g,离心10 min,转移上清到新的离心管;

3) 去除大体积颗粒。步骤 2得到的上清,4℃,14000 g,离心30 min,转移上清到新的离心管。

2. Spin Column 01离心柱预处理

1) 根据待分离外泌体样本数量,从试剂盒中取出相同数量的Spin Column 01Collection Tubes (mL)打开Spin Column 01下端堵头,将其放入Collection Tubes (2 mL)中,用移液器吸弃Spin Column 01上层的保护液体

2) Spin Column 01中加入500 μL Solution A,300 g,离心1 min,弃去Collection Tubes中废液;

3) 重复步骤21

4) 将Spin Column 01放入新的2 mL离心管中,用于下一步外泌体的分离。

注意:如果样本体积不超过0.2 mL,也可以使用1.5mL离心管。

3. 分离外泌体

1) 将预处理后的样本(50-500 μL)加入到上述预处理的Spin Column 01中,4℃300g,离心1 min

a. 如果样品体积超过0.5 mL,建议试用50 kDa滤管浓缩样品至0.5 mL,注意浓缩体积不超过20倍。

b. 对高粘度样本,如血浆、血清、胸腹水等样本,可用等体积去离子水稀释再加入到Spin Column 01

c. 对杂质较多的样本,如血浆、血清、胸腹水、牛奶等样本,建议用PBS稀释10倍,经过50 kDa超滤管浓缩 10倍;然后加入剩余液体10倍体积的PBS,超滤浓缩10倍后再用Spin Column 01分离外泌体。d. 离心法分离时,控制离心力在300-500 g若样本粘度大,适当增加离心力),才能实现良好的外泌体分离效果。

2) 取下Spin Column 01,离心管中液体即为分离的外泌体,取一部分进行检测,其余溶液置于-80℃保存。

注意:根据外泌体溶液性质对后续实验的影响,选择是否使用超滤管(MWCO:10 kDa)置换其他溶液。

(二)使用方法(游离染料去除)

1. Spin Column 01离心柱预处理

1) 根据染料去除样本数量,从试剂盒中取出相同数量的Spin Column 01Collection Tubes (2 mL)打开Spin Column 01下端堵头,将其放入Collection Tubes (2 mL)中,用移液器吸弃Spin Column 01上层的保护液体;

2) 向Spin Column 01中加入500 μL Solution A300 g,离心1 min,弃去Collection Tubes中废液;

3) 重复步骤21次;

4) 将Spin Column 01放入新的1.5 mL离心管中,用于下一步外泌体的分离。

2. 去除游离染料

1) 将荧光染料标记的外泌体样本(50-200 μL)加入到上述预处理的Spin Column 01中,4℃300 g,离心1 min

2) 取下Spin Column 01,离心管中液体即为分离的外泌体,可进行后续实验。

FAQs

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A:

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