细胞学堂 | Advanced培养基：更优质的细胞培养选择

在细胞培养过程中，培养基的重要性不言而喻。它不仅是细胞生长和增殖的物质基础，还直接影响着细胞的生长状态、表型、功能以及实验的准确性和可重复性。培养细胞时，通常会添加10%的血清，然而，这种做法伴随着成本高、批次间差异大以及潜在的污染风险等问题。

血清在传统培养基中的主要作用是为细胞提供必要的营养和生长因子，但由于血清成分复杂且存在批次间差异，可能导致实验结果的波动性。Advanced培养基通过减少血清的使用量，有效降低了这些变异性，提高了实验的可重复性和一致性。

用Advanced培养基替换基础培养基，仅需添加L-丙氨酰-L-谷氨酰胺或L-谷氨酰胺以及减少添加量血清，即可制备完全培养基。对于大多数细胞系，无需驯化或经间接适应过程，即可将培养基中的血清用量减少至少50%。

Advanced培养基成分经过优化后，能够为细胞提供更合适的生长环境，减少不必要的成分干扰。与经典完全培养基（含10%血清）相比，多种细胞在Advanced培养基中减血清（含2-5%血清，甚至更低）培养，表现出相同甚至更优的增殖效果，且细胞形态不发生显著变化。

并非所有的细胞都适合使用Advanced培养基减血清培养，尝试减血清培养前，务必先用少量细胞测试使用效果，确保减血清对细胞状态无影响后再进行大量替换。

Advanced培养基中特别添加了乙醇胺、谷胱甘肽等成分，以减少血清的使用量。通常情况下，细胞可减少原完全培养基至少一半的血清用量，如想进一步减少血清用量（如低至0.5-2%），需针对每种细胞系进行更低水平血清培养适应，以实现更大幅度的血清减少。

使用Advanced培养基虽能实现血清用量的减少，但对于血清品质的要求并未降低，建议使用高品质的胎牛血清进行细胞培养。

在细胞进行Advanced培养基减血清培养适应前，请确保细胞状态良好。如更换培养基前存在细胞状态差甚至有不易察觉污染的情况（如支原体或黑胶虫污染），则细胞适应Advanced培养基减血清培养的成功率将大幅降低。

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