细胞学堂 | 收到的细胞脱落了？碎片多？黑点多？
来源：Pricella 发布时间：2021-11-30 16:51:09
科学研究中需要用到各种细胞系作为实验模型，这些细胞系通常可以从各大细胞库获取。
而在收到细胞库寄送来的常温细胞时，常常会遇到一些问题，比如细胞脱落、皱缩、有黑点。
这篇文章将帮助大家解决这些常见问题。
收货时，细胞脱落
有些细胞本身贴壁不牢，很容易造成细胞脱落（如293系列，TM3，TM4，Raw264.7，原代内皮细胞，原代平滑肌细胞）。
另外，运输过程中受到碰撞或气温过低，也可能导致细胞脱落。
处理办法
① 将脱落细胞进行离心收集，并在离心管中消化。
② 仍然贴壁的细胞，按照常规方法加入胰酶或其他解离剂消化。
③ 再将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合，按比例接种到新的培养器皿中。
▲ 常温运输的C2C12细胞收货时发现脱落细胞
▲C2C12细胞处理后第二天，
有少量漂浮细胞
▲C2C12细胞处理后第四天，
细胞正常生长
（图片由客户提供，仅供学习参考）
收货时，细胞皱缩
运输过程中，路途颠簸加上温度不稳定，常温细胞会发生回缩。
处理办法
放入培养箱静置2-4小时，若4小时后仍然没有伸展，延长静置时间。注意，过夜静置时，需倒出部分培养基，留5-10mL在瓶中，瓶盖拧松透气，保持气体交换（L15培养体系除外）。
若有脱落细胞，需离心收集。
▲SH-SY5Y细胞发货前状态
（普诺赛提供）
▲SH-SY5Y细胞收货后状态
(客户提供)
▲ SH-SY5Y细胞收货时
皱缩、脱落
▲ SH-SY5Y细胞
处理后第三天
（图片由客户提供，仅供学习参考）
收货时，细胞黑点较多
当受到运输环境影响时，细胞会发生应激反应，分泌活动增加，导致分泌蛋白增多，呈黑色圆球状，分布无规律。
同时，路途中凋亡的细胞碎裂后将产生细胞碎片，为黑色或透明色，呈不规则状，分布无规律。
另外，有些细胞本身分泌活动较强，培养时常伴随黑点。
处理办法
★贴壁细胞放培养箱静置2-4小时后，正常换液或传代；
★悬浮细胞800~1000rpm（约160~200g） 低速离心3min去除细胞碎片。通常培养数天后，细胞状态会逐渐稳定下来。
▲KYSE-30细胞收货时
观察到细胞碎片
▲ KYSE-30细胞继续
培养后细胞碎片减少
（图片由客户提供，仅供学习参考）
小贴士：遇到小黑点问题时，首先要排除微生物污染，再按以上办法解决哦~
细胞碎片/分泌物和微生物污染的区别
细胞碎片/分泌物 | 微生物污染 | |
形态 | 大小不一的黑色圆点，或不规则形状 | 圆球状或杆状， 形态非常规则 |
是否运动 | 原地震动，布朗运动 或相对液体静止 | 快速游动，快速转圈或 相对液体静止 |
分布情况 | 视野中分布无规律 | 视野中分布均匀 |
增长情况 | 无抗生素条件下 不增多或缓慢增多 | 无抗生素条件下 48-72小时内爆发式增多 |
细胞碎片
（由客户提供，仅供学习参考）
微生物污染
（由客户提供，仅供学习参考）
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