细胞学堂 | 培养BEAS-2B需要血清吗
来源：Pricella 发布时间：2022-09-26 09:56:08
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BEAS-2B（人正常肺上皮细胞）是一种SV40大型t抗原永生化的人肺上皮细胞系，被广泛用作肺上皮细胞的体外模型，包括毒理学测试、呼吸损伤、伤口愈合和肿瘤转化；除此之外，它还是合适的转染宿主。
BEAS-2B 的表型为何不同
BEAS-2B细胞为上皮细胞样，而有客户反应，自己培养的形态像成纤维细胞，不像上皮细胞，与ATCC中的细胞形态不一致（如图1，2）。
图1. 客户培养的BEAS-2B形态（仅供学习参考）
图2. ATCC上的BEAS-2B形态
这是因为BEAS-2B细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力，培养时加与不加血清，会出现不同的细胞形态。BEAS-2B常用的培养条件有2种：BEBM 支气管上皮细胞生长培养基（不含血清），或DMEM+10%FBS。
用不含血清的培养基培养时，BEAS-2B细胞具有典型的呼吸上皮细胞多边形态；用含血清的培养基培养时，密度低时细胞形态会呈长梭型，但密度高一些以后形态会变短。
注意：
#传代密度不能太低，最少不能低于60%；
#使用BEBM培养基培养时，培养瓶应预先涂有溶解在BEBM培养基中的 0.01 mg/mL 纤连蛋白、0.03 mg/mL I 型牛胶原蛋白和 0.01 mg/mL 牛血清白蛋白的混合物；
#血清影响细胞贴壁性，进一步影响细胞形态；
#培养条件的改变对细胞形态和功能都有影响；
#不要随意更改细胞培养条件。
有无血清对细胞的影响
1
比较添加或不添加胎牛血清的BEAS-2B全基因组基因表达，发现多种生物途径的表达发生了改变，包括与致癌和能量代谢相关的途径；
2
对BEAS-2B中耗氧量和糖酵解的实时测量表明，胎牛血清培养条件下，总糖酵解能力增加1.4倍，基础呼吸增加1.9倍；
3
与不含胎牛血清的BEAS-2B相比，ATP产生的氧气消耗增加0倍，最大呼吸增加 2.8倍；
4
比较胎牛血清暴露于1μM亚砷酸钠引起的转录组变化导致的BEAS-2B的转录组变化，发现43%的亚砷酸盐调节基因的 mRNA水平也受到胎牛血清的调节；
5
细胞毒性研究显示，暴露于5%胎牛血清8周的BEAS-2B细胞对亚砷酸盐细胞毒性的敏感性几乎是非暴露于胎牛血清的BEAS-2B细胞的5倍；
6
胎牛血清诱导的BEAS-2B的表型变化表明，在使用BEAS-2B作为砷毒性的实验模型时 ，应仔细考虑培养条件。
参考文献
[1] Zhao F , Klimecki W T . Culture conditions profoundly impact phenotype in BEAS‐2B, a human pulmonary epithelial model[J]. Journal of Applied Toxicology Jat, 2015, 35(8):945-951.
注：部分图片来源于网络
