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细胞学堂 | 神经元细胞漂浮问题处理大全

来源:Pricella  发布时间:2022-11-08 13:22:01

 

神经元是具有长突触(轴突)的细胞,它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘,组成神经纤维,它的末端的细小分支叫做神经末梢。

细胞体位于脑、脊髓和神经节中,细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分,又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突,可以接受刺激并将兴奋传入细胞体;每个神经元只有一个轴突,可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织,如肌肉或腺体。


 大鼠皮层神经元细胞

图1. 大鼠皮层神经元细胞


神经元细胞比较脆弱,收货时细胞可能会漂。

今天,普诺赛就教大家如何处理收货漂浮,并整理好了培养注意事项,让您的实验顺畅无阻!


收到有漂的细胞怎么办

1

到货后先不用开瓶,放培养箱稳定4小时;

2

神经元细胞由于对温度和震动比较敏感,所以细胞收货有漂的细胞团属于正常现象,如果还没准备好做实验,可收集细胞团放回原瓶培养,并尽快准备实验。若原瓶为不透气瓶盖,一定要拧松瓶盖培养,正常T25瓶留5~6mL培养液就好。


 如何处理漂的神经元细胞团 

收集所有细胞悬液,1200rpm 5min离心,保留沉淀;

加入1mL左右0.125%胰酶轻柔重悬混匀细胞,不能吹打,放入4℃冰箱消化细胞,静置3-5min;


消化时间到后,加入5mL完全培养基终止消化,1200rpm 5min离心;

去掉上清,加入5mL完全培养基(可补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内(需对培养容器进行包被)

接种后绝对静置24-48h,48h后观察,否则细胞容易聚团。


培养注意事项 /


1

神经元细胞不能传代,在实验准备好之前只需换液培养,换液的时候注意收集漂的细胞团;

2

铺板孔板要包被,消化用稀释一倍的胰酶,即0.125%的胰酶(0.25%胰酶用PBS稀释一倍),放4℃冰箱消化3~5min;

3

细胞遇冷易收缩脱落,所用试剂需37℃预热,室温观察时间不宜过长;

4

神经元细胞由于贴壁疏松,正常培养和发货都用多聚赖氨酸包被过,所以消化时间要延长,或者分次消化;

5

正常养的好的神经元细胞可以活很久,但是慢慢会有杂细胞生长,无法避免。所以如果实验周期较长,建议在收货一周内尽快铺板做实验


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