细胞学堂 | 原代细胞的取材方法

取材的组织尽量在4~6h内制作成细胞。若不能及时培养，可将组织浸泡于培养液内，放置于冰浴或4℃冰箱中。如果组织块很大，应先将其切成1cm³以下的小块再低温保存，但时间不能超过24h。

取材时应严格无菌操作，用无菌包装的器皿或用事先消毒好的、带少许培养液（内含青、链霉素）的小瓶等便于携带的物品取材。

取材和原代培养时，要用锋利的器械如手术刀切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。

对于组织样本带有的血液、脂肪、神经组织、结缔组织和坏死组织，取材时要细心除去；分离时为避免组织干燥，可在含少量培养液的器皿中进行。

原代培养，特别是正常细胞的培养，应采用营养丰富的培养液，最好添加胎牛血清。

一般来说，胚胎组织较成熟个体的组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长。

为了便于以后鉴别原代组织的来源和观察细胞体外培养后与原组织的差异性，原代取材时要同时留好组织学标本和电镜标本。

一般皮肤、黏膜主要取自手术过程中切除的部分组织；如特殊需要也可酌情单独取材。方法似外科取断层皮片手术的操作，但面积一般在2~3mm²即可。这样局部不留瘢痕。注意取材时不要用碘酒消毒，必要时可用高浓度抗生素溶液漂洗。

一般多采用静脉取血，微量时也可以从指尖或耳垂取血。为防止凝血常用肝素抗凝剂，抗凝剂的量以产生抗凝效果的最小量为宜，量过大易导致溶血。肝素常用浓度为20U/mL，抽血前针管要用浓度较高的肝素（500U/mL）湿润。抽血时要严格无菌。