细胞学堂 | 293细胞系家族谱系大揭秘

HEK293细胞的历史可以追溯到1973年，当时荷兰莱顿大学的Alex Van Der Eb博士和Frank Graham博士在研究人类腺病毒（Adenovirus）时培养了这种细胞，细胞命名中的数字可以追溯到他的第293次实验产生的原始细胞克隆这一事实。通过腺病毒5（Ad5 DNA）进行了转染，由于存在Ad5 E1A/B基因，使其细胞周期以及细胞表型、核型等发生了改变，获得永生化特性，在生产腺病毒载体和腺相关病毒载体、生产蛋白、疫苗、抗癌试剂以及细胞生物学研究上广泛应用。

目前为止，HEK293细胞有多种衍生细胞系，每种细胞系的特点不尽相同，用途也存在着差异。今天小普给大家介绍下有关293T、293F、293H和293S四大分支细胞的特点及用途。

HEK293细胞系及其衍生/历史的示意图

HEK293T

它是HEK293细胞系的亚克隆，经过修饰表达SV40 T抗原，其表达的SV40T抗原可以实现外源表达载体的扩增，最终增加目的基因表达，常用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。

HEK293H

来自表达E1A腺病毒基因的HEK293细胞，粘附性较强，常用于噬菌斑检测实验和重组蛋白的表达和生产。在293H细胞中插入EBNA-1基因可得到293E，该基因含有EBV复制起点（oriP）的重组表达载体，能够在H293E细胞中复制，显著提高蛋白的表达；293-6E细胞是在293-H细胞表达截断的EBNA1，其能够在无血清培养体系中进行蛋白表达及病毒载体的生产。

HEK293F

由HEK293细胞系衍生的一个可以在无血清培养基中快速增长的细胞系，可以高效表达蛋白。由293F细胞导入pCMVSPORT6TAg.Neo质粒可获得293FT，可以用于生产慢病毒载体和基因编辑等领域。293FTM细胞是由Flp-InTM T-RExTM 293细胞导入单嗜性（ecotropic）报告质粒和MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap) 报告质粒获得，常用于蛋白互作筛选。

HEK293S

用逐渐适应性培养的方法，将细胞驯化成能够悬浮培养且耐受低Ca²⁺培养的细胞系，即293S细胞。293S细胞用甲烷磺酸诱变和蓖麻毒素选择修饰，再转染pcDNA6/TR质粒，得到293SG细胞，常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。此外，该细胞系中具有四环素表达抑制基因，也可用于四环素诱导的蛋白表达研究。；用pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒对293SG细胞进行转化，得到293SGGD细胞，用于糖基化工程研究中。