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研究表明,细胞培养中有15-35%的细胞存在支原体污染,有些地区甚至高达80%。因此支原体检测成为了细胞质控中不可缺少的环节,被列入《中国药典》检测的范畴。
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细胞培养是指细胞在体外的培养技术,即在无菌条件下,从机体中取出组织或细胞,模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件,让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。
一般来说,正常情况下,细胞培养一段时间后,正常生长的小细胞们贴在壁上,优哉游哉地享受生活,而没能存活的细胞和其他种类的细胞则可能悬浮在上,如果你的细胞不贴壁,极有可能是没有存活下来。
人体内由于细胞分裂失控从而无限增殖的细胞被称为肿瘤细胞,具有转移能力的肿瘤被称为恶性肿瘤,又称为癌(Cancer)。
胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在母牛怀孕的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,显然,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
贴壁细胞传代前,需要把细胞用消化试剂从培养容器表面解离出来,细胞得以分离成单个悬液传代至含新鲜培养基的新容器内。常用的消化试剂包括两大类:酶类非酶类。
细胞凋亡(apoptosis)指为维持机体内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。凋亡的发生并不是一蹴而就,因此,针对不同凋亡事件的检测方法众多种多样,常用的方法包括细胞的形态学观察,磷脂酰丝氨酸外翻分析,检测线粒体膜势能,检测片段化的DNA所采用的Tunel法,Caspase活性检测,凋亡相关蛋白的检测等。
在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。细胞计数一般用血细胞计数板,按白细胞计数方法进行计数,便于确定细胞的生活状况。