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  • Advanced DMEM

    货号:PM153210

    规格:500mL

    价格: ¥260

    数量: - +

    Advanced DMEM培养基是一款可以减少胎牛血清(FBS)添加量,广泛应用于哺乳动物细胞培养的基础培养基,与经典DMEM培养基相比,在保持细胞生长速率和形态的情况下,血清用量可减少50-90% ,从而降低细胞培养过程中血清用量,有效降低细胞培养成本。许多细胞系不需要驯化即可使用这种培养基,无需驯化即可成功培养的细胞包括Vero、COS-7、A549、3T3-L1、HuH-7、MDA-MB-231、SW620、NRK-52E、A-673、C2C12、RH-35、Ishikawa、CHL等。

    产品信息

    形态液体
    浓度
    规格500 mL
    pH7.0-7.4
    D-葡萄糖4500 mg/L
    L-谷氨酰胺1168 mg/L
    丙酮酸钠110 mg/L
    酚红15 mg/L
    非必需氨基酸
    HEPES
    渗透压320-370 mOsm/kg
    溶剂纯化水
    储存条件2-8℃,避光
    运输条件冰袋运输
    有效期12个月

    产品使用说明

    1. Advanced DMEM培养基作为一款减血清培养基,能达到减血清效果是因为添加了以下成分:乙醇胺、谷胱甘肽、抗坏血酸、胰岛素、转铁蛋白、牛血清白蛋白以及多种微量元素(亚硒酸钠、偏钒酸铵、硫酸铜和氯化锰)。

    2. Advanced DMEM培养基使用时需要补充1–5%胎牛血清和L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液(GlutaMAX)(货号:PB180419以维持细胞正常生长。

    3. 部分细胞培养使用胎牛血清(FBS)的推荐添加量:

    细胞名称FBS 推荐添加量
    Vero2-5%
    COS-72-5%
    A5492-5%
    SW6205%
    NRK-52E5%
    A-6735%
    3T3-L15%
    bend.35%
    NRK-52E5%
    C2C125%
    RH-355%
    Ishikawa5%
    CHL5%
    RG25%
    HS 578T5%
    HuH-75%
    CAL 275%
    MDA-MB-4685%
    MDA-MB-2315%

    (列表以外的细胞请参考下方方法测试优化)

    对于大多数细胞系,使用Advanced培养基时不需要适应,可直接降低血清50%而不影响细胞状态,参考直接适应方法。如果观察到细胞生长速度变慢、形态改变、次级代谢物产生水平不理想或需要进一步降低血清浓度时,则需采取一定的方法使之间接适应低血清环境,参考间接适应法。

    直接适应

    (1) 直接使用降低50%胎牛血清的Advanced培养基,替换原有的常规完全培养基,按照常规培养方法换液和传代培养。

    (2) 细胞能够持续增长维持3代以上,可以认为细胞已经适应新培养基。

    注:如果培养过程中观察到细胞状态不佳,则需采用间接自适应的方法。

    间接适应

    (1) 采取Advanced完培:原配方完培=25:75的比例混合新旧培养基;

    (2) 监测细胞生长和传代培养,逐步增加新培养基与原始培养基的比例直至全部更换为新的Advanced培养基,参考25:75→50:50→75:25→90:10→100:0的顺序,每个步骤可能需要多次重复直至细胞100%适应新的减血清培养基。

    (3) 在100%的Advanced减血清完全培养基中细胞持续增长3代以上,可认为已适应新培养基。

    注意事项

    1. 并非所有的细胞都适合减血清培养,务必小量测试使用效果后进行替换必要时针对每种细胞系优化胎牛血清浓度,以达到较大限度的减少血清添加量

    2. 本产品已过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;

    3. 为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理;

    4. 本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。

    FAQs

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