Advanced DMEM/F12培养基是一款可以减少胎牛血清(FBS)添加量,广泛应用于哺乳动物细胞培养的基础培养基,与经典DMEM/F12培养基相比,在保持细胞生长速率和形态的情况下,血清用量可减少50-90%,从而降低细胞培养过程中血清用量,有效降低细胞培养成本。许多细胞系不需要驯化即可使用这种培养基,无需驯化即可成功培养的细胞包括Vero、LX-2、KGN、C8-D1A、Hela、NIH-3T3、KLE、ARPE-19、4T1、NIH-3T3、JHH-7、NCI-H2009等。
产品信息
形态 | 液体 |
浓度 | 1× |
规格 | 500 mL |
pH | 7.0-7.4 |
D-葡萄糖 | 3151 mg/L |
L-谷氨酰胺 | 365 mg/L |
丙酮酸钠 | 110 mg/L |
酚红 | 8.1 mg/L |
非必需氨基酸 | 有 |
HEPES | 无 |
渗透压 | 300-340 mOsm/kg |
溶剂 | 纯化水 |
储存条件 | 2-8℃,避光 |
运输条件 | 冰袋运输 |
有效期 | 12个月 |
产品使用说明
1. Advanced DMEM/F12培养基作为一款减血清培养基,能达到减血清效果是因为添加了以下成分:乙醇胺、谷胱甘肽、抗坏血酸、胰岛素、转铁蛋白、牛血清白蛋白以及多种微量元素(亚硒酸钠、偏钒酸铵、硫酸铜和氯化锰)。
2. Advanced DMEM/F12培养基使用时需要补充1–5%胎牛血清和L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液(GlutaMAX)(货号:PB180419)以维持细胞正常生长。
3. 部分细胞培养使用胎牛血清(FBS)的推荐添加量:
细胞名称 | FBS推荐添加量 |
Vero | 5% |
LX-2 | 5% |
KGN | 5% |
UMNSAH/DF-1 | 5% |
C8-D1A | 5% |
Hela | 5% |
EA.hy926 | 5% |
CRFK | 2-5% |
U-2 OS | 2-5% |
MDA-MB-468 | 2-5% |
JEG-3 | 5% |
SiHa | 2-5% |
KLE | 5% |
ARPE-19 | 2-5% |
4T1 | 2-5% |
NIH-3T3 | 2-5% |
BRL | 2-5% |
JHH-7 | 5% |
NCI-H2009 | 5% |
(列表以外的细胞请参考下方方法测试优化)
对于大多数细胞系,使用Advanced培养基时不需要适应,可直接降低血清50%而不影响细胞状态,参考直接适应方法。如果观察到细胞生长速度变慢、形态改变、次级代谢物产生水平不理想或需要进一步降低血清浓度时,则需采取一定的方法使之间接适应低血清环境,参考间接适应法。
直接适应
(1) 直接使用降低50%胎牛血清的Advanced培养基,替换原有的常规完全培养基,按照常规培养方法换液和传代培养。
(2) 细胞能够持续增长维持3代以上,可以认为细胞已经适应新培养基。
注:如果培养过程中观察到细胞状态不佳,则需采用间接自适应的方法。
间接适应
(1) 采取Advanced完培:原配方完培=25:75的比例混合新旧培养基;
(2) 监测细胞生长和传代培养,逐步增加新培养基与原始培养基的比例直至全部更换为新的Advanced培养基,参考25:75→50:50→75:25→90:10→100:0的顺序,每个步骤可能需要多次重复直至细胞100%适应新的减血清培养基。
(3) 在100%的Advanced减血清完全培养基中细胞持续增长3代以上,可认为已适应新培养基。
注意事项
1. 并非所有的细胞都适合减血清培养,务必小量测试使用效果后进行替换,必要时需针对每种细胞系优化胎牛血清浓度,以达到较大限度的减少血清添加量;
2. 本产品已过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;
3. 为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理;
4. 本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
FAQs
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