细胞学堂 | 手把手教你培养SV-HUC-1
来源：Pricella 发布时间：2022-04-24 08:48:48
SV-HUC-1 (人输尿管上皮永生化细胞)，是由猿猴空泡病毒40转染至1名11岁男孩的泌尿道上皮细胞，而建立起来的永生化细胞系。其分化特性与正常细胞相似，培养简单，可无限传代，却不属于肿瘤细胞[1]。
基础信息
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生长培养基：
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生长特性：贴壁，上皮细胞样
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推荐传代比例：1:2-1:4
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推荐换液频率：2~3次/周
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培养条件：
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
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冻存条件：
55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
SV-HUC-1细胞正常生长
细胞传代
01
从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；
02
用PBS冲洗细胞（每10cm2培养表面积约2mL 溶液）。从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液，以避免搅动细胞层，前后轻柔摇晃容器数次；
03
从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入0.25%胰酶（试剂量应足以覆盖细胞层）；
04
轻轻摇晃容器，使试剂完全覆盖细胞层，T25 细胞培养瓶留 200μL左右即可；
05
将培养容器放在培养箱中孵育5分钟左右，在显微镜下观察细胞解离情况；
06
当细胞解离程度≥ 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽，加入所用胰酶两倍体积的完全培养基，吹打细胞层表面数次，使培养基分散；
07
将细胞转移到无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟；
08
用最少体积的完全培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，再将细胞放回培养箱。
注意事项
1、待细胞汇合度达到80%-90%时，即可进行传代培养；
2、该细胞较难消化，注意延长消化时间。待消化到细胞收缩变圆，轻拍培养瓶侧边，细胞可以滑落方可终止消化；
3、如果使用培养瓶，在将其放入培养箱前，应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖。
●参考文献●
[1] 王惠惠, 陈锋, 朱佳玉, 席淑华, 孙贵范. 亚砷酸钠对SV-HUC-1细胞NRF2通路影响[J]. 中国公共卫生, 2017, 33(1): 95-97.
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