细胞学堂 | C2C12细胞培养攻略,C2C12细胞诱导分化步骤
来源：Pricella 发布时间：2022-06-20 13:59:35
C2C12 (小鼠成肌细胞)是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆。C2C12细胞分化很快，容易形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)处理C2C12细胞，会导致C2C12细胞的分化途径从成肌细胞转换为成骨细胞。
C2C12作为研究肌肉理想的细胞模型，在实验研究中常诱导其分化为多核肌管。成肌分化在肌肉再生中起重要作用，它是通过一种高度协调的序列程序来产生成熟的骨骼肌的过程。
基础信息
C2C12细胞状态直接影响着分化潜力，要想细胞分化做得好，首先要在培养上下功夫。该细胞的换液和传代步骤，参照其他贴壁细胞进行操作即可。除此之外，还有以下三点，需要留意：
1
该细胞生长速度快，容易分化，建议密度达70%时传代；
2
不要让细胞长得太满甚至开始融合，影响后续成肌分化率；
3
细胞消化完全后再吹打混匀，不要用枪头把没有消化好的细胞吹下来，以免细胞成团。
待C2C12细胞生长至汇合度为80%左右时，即可进行诱导分化。具体步骤如下:
01
丢弃旧培养基，用PBS清洗两次；
02
换分化培养基（高糖DMEM+2%~6%马血清+1% P/S）诱导，然后置于CO2恒温培养箱中进行培养；
备注：由于马血清品质不同，建议马血清做2%、4%、6%梯度测试，以确定最佳浓度。
03
每24h换液一次，在显微镜下观察细胞形态和生长状况。诱导分化成功时，可以看见肌管表现为厚的管状结构，有时为多核。
图2. C2C12细胞分化
参考文献
注：部分图片来源于网络
