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细胞学堂 | UMNSAH/DF-1(鸡胚成纤维细胞)空泡产生的原因及解决方法

来源:Pricella  发布时间:2022-06-28 14:00:05


UMNSAH/DF-1细胞在收货时经常会遇到“空泡”问题,今天给大家分享一下,空泡产生的原因,以及解决空泡问题的方法


先了解一下UMNSAH/DF-1细胞的各项信息,如下:


细胞名称:UMNSAH/DF-1(鸡胚成纤维细胞)

种属:家鸡

组织来源:胚胎,自发永生化

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:成纤维细胞样

生长培养基:DMEM10% FBS1% P/S

培养环境:气相:95%空气;5%CO2

             温度:39℃

推荐传代比例:1:3-1:4

冻存液配方:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO






细胞中的空泡一般指在光学显微镜下可见的, 具有不同于细胞质光学特征的泡状物。细胞中形成空泡的过程和现象称为空泡化。空泡可以来源于细胞内所有膜结构的细胞器,如线粒体,内质网,溶酶体,高尔基体,自噬溶酶体等。

以 UMNSAH/DF-1细胞为例,在发货前,细胞状态是正常的(如图1),可是在收货后却产生了很多空泡。这究竟是什么原因呢?

其实,这是因为UMNSAH/DF-1细胞在发货过程中,容易受到温度波动影响,而导致的细胞空泡增多。当细胞受到外界环境因素影响如温度时,细胞会发生内质网应激反应。细胞温度降低时,细胞膜上磷脂分子的运动减慢,流动性降低,从而降低了细胞膜对物质的通透性,钙离子内流,从而导致细胞质中色素堆积,空泡形成。

处理方法:

将收到的细胞正常传代,观察空泡是是否有减少,若空泡仍有很多,可增加传代次数,一般正常传代后这种情况就会有所好转!(如图2所示。)

UMNSAH/DF-1发货图片

图1. UMNSAH/DF-1发货图片


UMNSAH/DF-1收货图片
UMNSAH/DF-1传代培养

图2. UMNSAH/DF-1收货图片(左) 传代培养后图片(右)


注意

注意

1

细胞培养的最佳温度主要取决于细胞供体的体温,此外也受到解刨部位体温差异的影响。对于不同的动物细胞,所需要的培养温度也有所不同,对于禽类动物细胞,最佳培养温度为39℃,所以UMNSAH/DF-1细胞的最佳培养温度也为39℃。37℃培养会影响细胞状态,建议提前准备专用培养箱。

若我们在培养细胞过程中出现了空泡,也有可能是细胞凋亡或是营养不够等原因,针对不同的情况需要采用不同的解决办法。在实验中,我们可以通过时刻关注细胞的状态,及时换液,采用优质血清,保证细胞所需营养充足等,避免空泡的出现。


参考文献

[1] Jing Q C ,  Zhao J ,  Zhao B X , et al. The vacuolization and differentiation of vascular endothelial cells by a γ-butyrolactones derivative[J]. Journal of Shandong University, 2008.

[2] 张浩赟等. 胞质空泡化的研究进展[J]. 世界最新医学信息文摘, 2017, 17(34):3.


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