细胞学堂 | 超实用的细胞培养基知识盘点
来源:Pricella 发布时间:2024-08-20 13:53:00
细胞培养基不仅为细胞提供必要的营养物质,还为细胞的生长和繁殖提供适宜的环境。在细胞培养的过程中,选择合适的培养基是养好细胞的第一步。
本期细胞学堂将为大家详细介绍一些特殊的培养基,以及选用时的相关指标,帮助您快速上手选择合适的培养基,以满足不同实验需求。
常见细胞培养基可分为基础培养基、完全培养基和无血清细胞培养基三类。
在去年发布的干货中,我们详细介绍了关于MEM、DMEM、RPMI 1640、无血清培养基等常见培养基(点击查看原文),感兴趣的可以回顾下。
基础培养基主要是指未添加血清的合成培养基以及一些专为特定原代细胞设计的专用基础培养基。
无血清培养基是指通过添加已知成分的组分(如转铁蛋白、白蛋白、胰岛素等)替代血清,用于特定细胞培养的培养基。
完全培养基是指在基础培养基的基础上添加了血清的培养基,可能还含有一些特殊的细胞生长因子、抗生素(如双抗)等。
特殊细胞培养基属于合成培养基,通常需要搭配血清或者血清替代物来配制成完全培养基后使用。
由Glen Fischer在美国国家癌症研究所设计研制,最初用于小鼠白血病细胞的培养,现主要用于造血细胞的培养,如淋巴母细胞和淋巴细胞的培养。
该培养基含有多种细胞生长所需的氨基酸、维生素以及无机盐等成分,不含蛋白质、脂类或任何外源性生长因子。
由William和Gunn共同研制,主要用于大鼠肝上皮细胞的培养,也可用于其他哺乳动物的肝细胞培养。
该培养基含有多种细胞生长所需的氨基酸、维生素以及无机盐等成分,不含蛋白质、脂类或任何外源性生长因子,可以根据研究需要来调整L-谷氨酰胺的用量,在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长与增殖。
MCDB是为特定细胞设计的低蛋白和无血清培养的培养基,MCDB 131是MCDB培养基的一种,是由Knedler和Ham设计开发出来的,最初用于培养人微血管内皮细胞(HMVEC)。随着深入的研究,MCDB 131培养基除用于内皮细胞外,还可用于包括肝细胞、平滑肌细胞、心肌细胞在内的多种细胞类型。
MCDB 131培养基不同于传统培养基之处在于,其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤、胸腺嘧啶以及更高浓度的氨基酸和维生素。该培养基在使用时常与表皮生长因子(EGF)、氢化可的松、谷氨酰胺以及低浓度血清搭配使用,血清的添加浓度需根据细胞类型而定。
Opti-MEM I 减血清培养基,是一种经过改良的最低必需培养基,可以在减少50%常规血清用量的情况下,维持细胞的正常增殖。这一特性使其在细胞转染等实验操作中尤为适用。
01
糖的浓度
高糖培养基通常适合高代谢率及高密度细胞的培养。
02
酚红
酚红是一种酸碱指示剂,用于辅助判断试剂的pH值变化。酸性环境下偏黄色,碱性环境下偏紫色。
03
GlutaMAX
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,是L-谷氨酰胺的升级版本。L-谷氨酰胺在溶液中容易降解,但L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有良好的稳定性,可以作为L-谷氨酰胺的替代物。
04
钙、镁离子
钙、镁离子在细胞培养中有助于细胞彼此相连,增强细胞的黏附性,培养悬浮细胞可选择无钙镁离子的培养基。
以上是关特殊细胞培养基及选用指标的介绍,更多细胞培养相关干货,请持续关注细胞学堂专栏~